不銹鋼固體發酵罐是一種廣泛應用于生物工程、食品工業及制藥領域的關鍵設備,主要用于好氧性微生物在固態基質上的培養與發酵過程。其核心優勢在于采用優質304或316L不銹鋼材質制造,具有優異的耐腐蝕性、易清潔性和長使用壽命,完q符合GMP(藥品生產質量管理規范)及食品衛生標準。
不銹鋼固體發酵罐普遍配備PLC或DCS智能控制系統,可實時監測并自動調節溫度、pH值、濕度、轉速及進氣量等關鍵參數,大幅降低人工干預成本,提高發酵過程的穩定性和重復性。其設計注重衛生死角消除,內壁經拋光處理,支持CIP(原位清洗)和SIP(原位滅菌),確保無菌操作環境。
不銹鋼固體發酵罐的操作方法詳解:
一、操作前準備
1、設備檢查:
檢查罐體、攪拌槳、傳感器接口等部位是否有裂縫、變形或泄漏風險。
確保焊接部位密封性良好,避免滅菌過程中出現泄漏。
檢查進料口、出料口、通氣口、溫度傳感器接口、pH值傳感器接口等連接牢固,無松動或破損。
確保所有閥門(如進料閥、出料閥、排氣閥)開閉狀態正常,密封性能良好。
2、配套設備檢查:
檢查電源、空壓機、微機系統和循環水系統是否正常工作。
確保水壓、電壓、氣壓正常供應,進水壓維持在0.12MPa,允許在0.15~0.2MPa范圍變動,不能超過0.3MPa,溫度應低于發酵溫度10℃。
單相電源AC220V±10%,頻率50Hz,罐體可靠接地。
輸入蒸汽壓力應維持在0.4MPa,進入系統后減壓為0.24MPa。
空壓機壓力值0.8MPa,空氣進入壓力應控制在0.25~0.30MPa。
3、原料準備:
根據需要將培養基配入罐體,確保培養基成分符合要求,并經過嚴格的滅菌處理。
準確地稱量和混合原料,確保營養成分的均勻分布。
注意添加的水分要適量,以避免發酵液過于稀薄或濃稠,影響發酵效果。
4、傳感器校準:
使用標準溫度計對溫度傳感器進行校準,確保測量誤差在允許范圍內。
使用標準的pH緩沖液對pH電極進行校準,一般有兩種緩沖液,pH值分別為4.0和7.0。先將傳感器浸泡在pH7.0的緩沖液中,調整傳感器的讀數至7.0,然后再將傳感器浸泡在pH4.0的緩沖液中,根據傳感器的反應再次調整參數,確保pH值測量的準確性。
在確定的轉速和通氣量下對溶氧電極進行斜率標定,設定溶氧電極為100%。
二、滅菌處理
1、罐體滅菌:
關閉所有閥門,尤其是罐底閥,防止誤操作。
旋緊接種口蓋、補料口及罐蓋螺絲,確保密封性。
小型發酵罐(5L)可將罐體放入大滅菌鍋滅菌(115℃,30分鐘);大型發酵罐(10L及以上)采用蒸汽滅菌(121℃,30分鐘)。
滅菌過程中,確保罐內各個部位都能充分接觸到蒸汽,避免出現消毒死角。
消毒完成后,讓發酵罐自然冷卻或者通過適當的冷卻裝置冷卻至合適的發酵溫度。
2、空氣過濾系統滅菌:
打開蒸汽過濾器底部排污閥前面的供蒸汽閥,當冷凝水排凈后微開排污閥。
打開除菌過濾器底部排污閥,排凈管道中的冷凝水后,微開此排污閥。
打開除菌過濾器通往發酵罐內的閥門及旁邊的排汽閥,罐頂的排汽閥也要適度打開。
調整除菌過濾器上壓力表的壓力,使其保持為0.11MPa,計時30分鐘。
滅菌結束后,關閉各路蒸汽閥門,打開冷卻水閥門及排水閥門,同時打開空氣流量計和空氣放空閥門,把空氣過濾器吹干。此時必須注意罐壓的變化,絕對不能讓罐壓低于0.02MPa。及當罐壓達到0.05MPa時,立即將空氣管路打開,保證發酵罐的罐壓在0.05MPa左右。
三、接種與發酵
1、接種操作:
在接種口周圍使用火焰滅菌或者紫外線滅菌等方式保持接種環境的無菌狀態。
將適量的微生物種子液通過接種口緩慢加入發酵罐,接種量根據不同的發酵工藝和微生物種類而定,一般在5%~10%左右。
接種過程要嚴格遵循無菌操作原則,防止雜菌污染。
2、發酵控制:
通過安裝在發酵罐上的溫度控制裝置(如夾套冷卻系統或者加熱系統)將發酵溫度控制在適宜的范圍內。
根據微生物的生長特性和發酵要求,使用酸或堿溶液進行pH值調節。當pH值升高時,可以加入適量的酸性溶液(如稀鹽酸);當pH值降低時,可以加入堿性溶液(如氫氧h鈉溶液)。
通過溶氧電極實時監測溶解氧濃度,通過調節通氣量和攪拌速度來維持溶解氧在合適的水平。
發酵罐維持正壓既可以杜絕由于罐壓為零時造成的染菌,還可增加氧在培養液中的溶解度,有利于菌的生長及合成。在發酵培養期間,罐內壓力基本可以保持恒定。然而,在滅菌降溫的過程中,為避免負壓吸入環境的非潔凈空氣以及負壓可能將罐體吸癟情況的發生,需要通入一定的空氣保壓。
3、參數監控與調整:
發酵過程中需定期監測溫度、pH值、溶氧量等關鍵參數,以便及時調整發酵條件。
根據參數變化動態調控:溫度偏離設定值時,通過加熱或制冷模塊調整;pH下降時補加無菌氨水或NaOH溶液,pH上升時補加無菌鹽酸或有機酸;溶氧過低時,可提高攪拌轉速、增大通氣量或通入純氧;出現大量泡沫時,手動加入無菌消泡劑或啟動自動消泡系統。
四、出料與清洗
1、出料操作:
發酵結束后,首先關閉通氣系統和攪拌裝置。
然后打開出料閥,將發酵液通過出料口放出。出料過程要盡量平穩,避免發酵液濺出。
2、清洗與消毒:
發酵液出料后,立即對發酵罐進行清洗。先用清水沖洗掉罐內殘留的發酵液和雜質,然后可以使用適當的清洗劑進行清洗,以去除附著在罐壁和內部部件上的污垢和微生物。
清洗后,再用清水沖洗干凈,確保清洗劑無殘留。
最后進行消毒處理,以殺滅殘留的微生物,保證下次發酵的無菌狀態。
3、設備維護:
檢查攪拌裝置、閥門、傳感器等部件的磨損情況,如有損壞或者磨損嚴重的部件,及時進行更換。
對發酵罐的外觀進行清潔和保養,防止罐體生銹。
將發酵罐放置在干燥、通風良好的環境中,避免受潮和受到其他腐蝕性物質的侵害。
